Protéine rouge pyrogallique dans l'urine

Le principe de la méthode repose sur la mesure photométrique de la densité optique d'une solution d'un complexe coloré formé par l'interaction de molécules de protéines avec des molécules du complexe de colorant rouge pyrogallol et de molybdate de sodium (complexe Pyrogallol rouge-molybdate) en milieu acide. L'intensité de la couleur de la solution est proportionnelle à la teneur en protéines du matériau à l'étude. La présence de détergents dans le réactif fournit une définition équivalente de protéines de nature et de structure différentes.

Réactifs. 1) Solution de rouge de pyrogallol (PGK) à 1,5 mmol / l: 60 mg de PGK dissous dans 100 ml de méthanol. Conserver à une température de 0 à 5 ° C; 2) Solution tampon succinate à 50 mmol / l, pH 2,5: 5,9 g d’acide succinique (HOOC - CH2–СН2-COOH); 0,14 g d'oxalate de sodium (Na2C2O4) et 0,5 g de benzoate de sodium (C6H5COONa) est dissous dans 900 ml d’eau distillée; 3) solution de molybdate de sodium cristallohydraté à 10 mmol / l (Na2Moo4 × 2H2O): 240 mg de molybdate de sodium sont dissous dans 100 ml d’eau distillée; 4) Réactif de travail: à 900 ml de solution tampon de succinate, ajouter 40 ml de solution de PHC et 4 ml de solution de molybdate de sodium. Le pH de la solution est ajusté à 2,5 avec une solution d'acide chlorhydrique à 0,1 mol / l et son volume est ajusté à 1 l. Le réactif sous cette forme est prêt à l'emploi et est stable lorsqu'il est conservé dans un endroit sombre et à une température de 2 à 25 ° C pendant 6 mois; 5) solution d'albumine standard à 0,5 g / l.

Le cours de la détermination. On introduit 0,05 ml de l'urine étudiée dans le premier tube à essai, 0,05 ml de solution standard d'albumine dans le deuxième tube à essai et 0,05 ml d'eau distillée dans le troisième tube à essai (échantillon de contrôle), puis 3 ml de réactif de travail. Le contenu des tubes est mélangé et après 10 minutes, l'échantillon et l'étalon sont soumis à une photométrie par rapport à un échantillon témoin à une longueur d'onde de 596 nm dans une cuvette avec un trajet optique de 10 mm.

Le calcul de la concentration en protéines dans l'échantillon d'urine analysé est effectué selon la formule suivante:

où C est la concentration en protéines dans l'échantillon d'urine analysé, en g / l; Unpr et unst- extinction de l'échantillon d'urine étudié et de la solution standard d'albumine, en g / l; 0,5 - concentration de solution d'albumine étalon, g / l.

  • la couleur de la solution (complexe de couleur) est stable pendant une heure;
  • la relation directement proportionnelle entre la concentration de protéines dans l'échantillon et l'absorption de la solution dépend du type de photomètre;
  • lorsque la teneur en protéines dans l'urine est supérieure à 3 g / l, l'échantillon est dilué avec une solution de chlorure de sodium isotonique (9 g / l) et la détermination est répétée. Le degré de dilution est pris en compte lors de la détermination de la concentration en protéines.

3. Détermination de la protéine.

Principe de la méthode sur la base de la coagulation des protéines dans l’urine en présence d’acide nitrique (ou d’une solution à 20% d’acide sulfosalicylique).

Avancement des travaux: à 5 gouttes d'urine, ajoutez 1-2 gouttes d'acide nitrique (ou sulfosalicylique). En présence de protéines dans l'urine, il apparaît une turbidité.

Tableau Détection de composants pathologiques de l'urine.

Remarque: en présence de glucose et de protéines dans les urines examinées, leur contenu quantitatif est déterminé.

Détermination quantitative des protéines dans les urines par la méthode colorimétrique au rouge de pyrogallol.

Principe de la méthode: Lorsque la protéine interagit avec le rouge de pyrogallol et le molybdate de sodium, un complexe coloré se forme, dont l’intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration de la protéine dans l’échantillon.

Réactifs: Réactif de travail - solution de pyrogallol rouge dans du tampon succinate, solution de protéine d’étalonnage à une concentration de 0,50 g / l

Les échantillons se mélangent, attendez 10 minutes. à température ambiante (18-25 ° C). Mesurer la densité optique ressentie (Dop) et échantillon d'étalonnage (Dà) contre l'échantillon témoin à À = 598 (578-610) nm. La coloration est stable pendant 1 heure.

Calcul: la concentration en protéines dans l'urine (C) g / l est calculée par la formule:

Valeurs normales: jusqu'à 0,094 g / l, (0,141 g / jour)

Détermination quantitative du glucose dans les urines par la méthode de la glucose oxydase.

Principe de la méthode: Lorsque le D-glucose est oxydé par l'oxygène atmosphérique sous l'action de la glucose oxydase, il se forme une quantité équimolaire de peroxyde d'hydrogène. Sous l'action de la peroxydase, le peroxyde d'hydrogène oxyde les substrats chromogènes (mélange de phénol et de 4 aminoantipirine - 4ААP) en formant un produit coloré. L'intensité de la couleur est proportionnelle à la teneur en glucose.

2 N2Oh2 + phénol + 4ААП composé coloré + 4Н2Oh

Avancement des travaux: 1 ml de la solution de travail et 0,5 ml de tampon phosphate sont introduits dans deux tubes. 0,02 ml d'urine est ajouté au premier tube et 0,02 ml de l'étalon au second (étalonnage, solution de glucose standard, 10 mmol / l). Les échantillons sont mélangés, incubés pendant 15 minutes à une température de 37 ° C dans un thermostat et la densité optique est mesurée par essai (Dop) et étalonnage (Dà) des échantillons contre le réactif de travail à une longueur d’onde de 500-546 nm.

La teneur en glucose dans l'urine quotidienne est déterminée en mmol / jour en multipliant le résultat obtenu par le volume d'urine collecté par jour.

Note Lorsque le taux de sucre dans l’urine est supérieur à 1%, il faut le diluer.

Actuellement, les laboratoires biochimiques utilisent une méthode unifiée pour analyser le taux de glucose dans les urines en utilisant un test réactif du glucose ou des bandelettes combinées pour le PH, les protéines, le glucose, les corps cétoniques et le sang. Bandelettes réactives immergées dans un récipient contenant de l'urine pendant 1 seconde. et comparez la couleur sur l'échelle.

Nous traitons le foie

Traitement, symptômes, médicaments

Protéine rouge pyrogallique dans l'urine

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Normalement, la protéine est excrétée dans les urines en quantité relativement faible, ne dépassant généralement pas 100 à 150 mg / jour.

La diurèse quotidienne chez une personne en bonne santé est comprise entre 1 000 et 1 500 ml / jour; ainsi, la concentration en protéines dans les conditions physiologiques est de 8-10 mg / dL (0,08-0,1 g / l).

Les protéines totales dans l'urine sont représentées par trois fractions principales: l'albumine, les mucoprotéines et les globulines.

L'albumine dans l'urine est la partie de l'albumine sérique qui a été filtrée dans les glomérules et n'a pas été réabsorbée dans les tubules rénaux; L’excrétion normale d’albumine est inférieure à 30 mg / jour. Les tubules rénaux, en particulier la partie distale des tubules, sont une autre source importante de protéines dans l’urine. Ces tubules sécrètent les deux tiers de la quantité totale de protéines urinaires; Environ 50% de cette quantité sont représentés par la glycoprotéine de Tamm-Horsfall, sécrétée par l'épithélium des tubules distaux et jouant un rôle important dans la formation de calculs urinaires. D’autres protéines sont présentes dans l’urine en petites quantités et proviennent de protéines plasmatiques de faible poids moléculaire filtrées au travers du filtre rénal, qui ne sont pas réabsorbées dans les tubules rénaux, mais aussi de microglobulines de l’épithélium des tubules rénaux (RTE), ainsi que des écoulements prostatiques et vaginaux.

La protéinurie, c’est-à-dire que l’augmentation de la teneur en protéines dans l’urine est l’un des symptômes les plus importants, reflétant des lésions rénales. Cependant, un certain nombre d'autres conditions peuvent également être accompagnées d'une protéinurie. Par conséquent, il existe deux groupes principaux de protéinurie: la protéinurie rénale (vraie) et la protéinurie extrarénale (fausse).

Dans la protéinurie rénale, la protéine pénètre dans l'urine directement du sang en raison d'une augmentation de la perméabilité du filtre glomérulaire. La protéinurie rénale se rencontre souvent dans la glomérulonéphrite, la néphrose, la pyélonéphrite, la néphrosclérose, l'amylose rénale, diverses formes de néphropathie, par exemple la néphropathie chez la femme enceinte, les états fébriles, l'hypertension, etc. La protéinurie peut également être retrouvée chez les personnes en bonne santé après un effort physique intense, une hypothermie et un stress psychologique. Chez les nouveau-nés, une protéinurie physiologique est observée au cours des premières semaines de vie et, en cas d'asthénie chez les enfants et les adolescents, une protéinurie orthostatique (en position verticale du corps) est possible, associée à une croissance rapide entre 7 et 18 ans.

En cas de fausse protéinurie (extrarénale), la source de protéines dans l'urine est un mélange de leucocytes, d'érythrocytes, de cellules épithéliales des voies urinaires. La décomposition de ces éléments, particulièrement prononcée avec une urine alcaline, conduit à une pénétration de protéines dans l'urine, qui a déjà passé le filtre rénal. Le degré particulièrement élevé de fausse protéinurie donne du sang dans les urines, avec une hématurie profuse, il peut atteindre 30 g / l et plus. Maladies pouvant être accompagnées de protéinurie extrarénale - urolithiase, tuberculose rénale, tumeurs des reins ou des voies urinaires, cystite, pyélite, prostatite, urétrite, vulvovaginite.

La classification clinique comprend la protéinurie légère (moins de 0,5 g / jour), modérée (de 0,5 à 4 g / jour) ou grave (plus de 4 g / jour).

La plupart des patients atteints d'insuffisance rénale, telle que la glomérulonéphrite aiguë ou la pyélonéphrite, présentent une protéinurie modérée, mais les patients atteints du syndrome néphrotique excrètent généralement plus de 4 g de protéines dans l'urine par jour.

Une large gamme de méthodes est utilisée pour le dosage quantitatif des protéines, en particulier la méthode unifiée de Brandberg-Roberts-Stolnikov, la méthode biuret, la méthode à l'acide sulfosalicylique, les méthodes utilisant le colorant bleu de Coomassie, le colorant rouge pyrogallol, etc.

L'utilisation de diverses méthodes pour déterminer la présence de protéines dans l'urine a entraîné une grave confusion dans l'interprétation des limites de la norme de teneur en protéines dans l'urine. Puisque les 2 méthodes les plus couramment utilisées dans les laboratoires - avec l’acide sulfosalicylique et le colorant rouge pyrogallol, nous examinons le problème de l’exactitude des limites des normes les concernant. Du point de vue de la méthode sulfosalicylique dans l'urine normale, la teneur en protéines ne doit pas dépasser 0,03 g / l, et du pyrogallol, 0,1 g / l! Les différences sont triples.

Faibles valeurs de la concentration normale de protéines dans l'urine lors de l'utilisation de sulfosalicylique en raison des points suivants:

  • la courbe d'étalonnage est basée sur une solution aqueuse d'albumine. La composition de l'urine est très différente de celle de l'eau: pH, sel, composés de faible poids moléculaire (créatinine, urée, etc.). En conséquence, selon Altshuler, Rakov et Tkachev, une erreur de détermination de la protéine urinaire peut être 3 fois ou plus! C'est à dire des résultats de détermination corrects ne peuvent être obtenus que dans les cas où l'urine a un poids spécifique très bas et que sa composition et son pH se rapprochent de l'eau;
  • la sensibilité plus élevée de la méthode sulfosalicylique à l'albumine par rapport aux autres protéines (à ce moment-là, comme mentionné ci-dessus, l'albumine dans des échantillons d'urine normale ne représente pas plus de 30% de la protéine totale dans l'urine);
  • si le pH de l'urine est décalé du côté alcalin, l'acide sulfosalicylique est neutralisé, ce qui entraîne également une diminution des résultats du dosage des protéines;
  • la vitesse de sédimentation des précipités est sujette à des variations significatives: à faibles concentrations en protéines, les précipitations sont ralenties et la fin précoce de la réaction conduit à une sous-estimation du résultat;
  • la vitesse de réaction dépend essentiellement du mélange du mélange réactionnel. À forte concentration de protéines, une secousse vigoureuse du tube peut entraîner la formation de gros flocons et leur précipitation rapide.

Toutes les caractéristiques de la méthode énumérées ci-dessus entraînent une sous-estimation significative de la concentration en protéines déterminée dans l'urine. Le degré de sous-déclaration dépend fortement de la composition d'un échantillon d'urine particulier. Étant donné que la méthode de l'acide sulfosalicylique donne une valeur sous-estimée de la concentration en protéines, la limite normale de cette méthode est également de 0,03 g / l, environ trois fois trop basse par rapport aux données fournies dans les ouvrages de référence étrangers sur les diagnostics de laboratoire clinique.

La grande majorité des laboratoires des pays occidentaux ont abandonné l'utilisation de la méthode sulfosalicylique pour déterminer la concentration de protéines dans l'urine et ont activement utilisé la méthode au pyrogallol à cette fin. La méthode au pyrogallol pour déterminer la concentration en protéines dans l’urine et d’autres liquides biologiques est basée sur le principe photométrique de mesure de la densité optique d’un complexe coloré formé par l’interaction de molécules protéiques avec des molécules de colorant rouge pyrogallol et de molybdate de sodium (complexe Pyrogallol rouge - molybdate).

Pourquoi la méthode au pyrogallol permet d’obtenir des résultats plus précis de la mesure de la concentration en protéines dans l’urine? Premièrement, en raison de la plus grande multiplicité de dilutions d'échantillons d'urine dans le mélange réactionnel. Si, dans la méthode sulfosalicylique, le rapport échantillon d'urine / réactif est de 1/3, dans la méthode au pyrogallol, il peut être compris entre 1 / 12,5 et 1/60, selon la variante de la technique, ce qui réduit considérablement l'effet de la composition de l'urine sur le résultat de la mesure. Deuxièmement, la réaction se déroule dans un tampon succinate, c'est-à-dire à un pH stable. Et, enfin, on peut dire que le principe même de la méthode est plus «transparent». Le molybdate de sodium et le colorant rouge pyrogallol forment un complexe avec une molécule de protéine. Cela conduit au fait que les molécules de colorant à l'état libre qui n'absorbent pas la lumière à une longueur d'onde de 600 nm en combinaison avec une protéine absorbent la lumière. Ainsi, nous semblons marquer chaque molécule de protéine d’un colorant et nous constatons que la modification de la densité optique du mélange réactionnel à une longueur d’onde de 600 nm est clairement corrélée à la concentration de protéines dans l’urine. De plus, l’affinité du rouge pyrogallol avec les différentes fractions protéiques étant presque la même, la méthode permet de déterminer la protéine totale dans l’urine. Par conséquent, la limite des valeurs normales de la concentration en protéines dans l'urine est de 0,1 g / l (cela est indiqué dans toutes les directives occidentales modernes en matière de diagnostic clinique et de laboratoire, y compris le «Manuel clinique pour les tests de laboratoire», publié par N. Titsa).. Les caractéristiques comparatives des méthodes pyrogallol et sulfosalicylique pour la détermination de la protéine urinaire sont présentées dans le tableau 1.

En conclusion, je voudrais insister une nouvelle fois sur le fait que, lorsque le laboratoire passe de la méthode sulfosalicylique pour la détermination des protéines urinaires à la méthode pyrogallol, la limite des valeurs normales augmente de manière significative (de 0,03 g / l à 0,1 g / l!). Ce personnel de laboratoire doit certainement informer les cliniciens, car Dans cette situation, le diagnostic de protéinurie ne peut être posé que dans les cas où la teneur en protéines dans l'urine dépasse 0,1 g / l.

Nous traitons le foie

Traitement, symptômes, médicaments

Détermination des protéines dans l'urine par le rouge pyrogallol

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Normalement, la protéine est excrétée dans les urines en quantité relativement faible, ne dépassant généralement pas 100 à 150 mg / jour.

La diurèse quotidienne chez une personne en bonne santé est comprise entre 1 000 et 1 500 ml / jour; ainsi, la concentration en protéines dans les conditions physiologiques est de 8-10 mg / dL (0,08-0,1 g / l).

Les protéines totales dans l'urine sont représentées par trois fractions principales: l'albumine, les mucoprotéines et les globulines.

L'albumine dans l'urine est la partie de l'albumine sérique qui a été filtrée dans les glomérules et n'a pas été réabsorbée dans les tubules rénaux; L’excrétion normale d’albumine est inférieure à 30 mg / jour. Les tubules rénaux, en particulier la partie distale des tubules, sont une autre source importante de protéines dans l’urine. Ces tubules sécrètent les deux tiers de la quantité totale de protéines urinaires; Environ 50% de cette quantité sont représentés par la glycoprotéine de Tamm-Horsfall, sécrétée par l'épithélium des tubules distaux et jouant un rôle important dans la formation de calculs urinaires. D’autres protéines sont présentes dans l’urine en petites quantités et proviennent de protéines plasmatiques de faible poids moléculaire filtrées au travers du filtre rénal, qui ne sont pas réabsorbées dans les tubules rénaux, mais aussi de microglobulines de l’épithélium des tubules rénaux (RTE), ainsi que des écoulements prostatiques et vaginaux.

La protéinurie, c’est-à-dire que l’augmentation de la teneur en protéines dans l’urine est l’un des symptômes les plus importants, reflétant des lésions rénales. Cependant, un certain nombre d'autres conditions peuvent également être accompagnées d'une protéinurie. Par conséquent, il existe deux groupes principaux de protéinurie: la protéinurie rénale (vraie) et la protéinurie extrarénale (fausse).

Dans la protéinurie rénale, la protéine pénètre dans l'urine directement du sang en raison d'une augmentation de la perméabilité du filtre glomérulaire. La protéinurie rénale se rencontre souvent dans la glomérulonéphrite, la néphrose, la pyélonéphrite, la néphrosclérose, l'amylose rénale, diverses formes de néphropathie, par exemple la néphropathie chez la femme enceinte, les états fébriles, l'hypertension, etc. La protéinurie peut également être retrouvée chez les personnes en bonne santé après un effort physique intense, une hypothermie et un stress psychologique. Chez les nouveau-nés, une protéinurie physiologique est observée au cours des premières semaines de vie et, en cas d'asthénie chez les enfants et les adolescents, une protéinurie orthostatique (en position verticale du corps) est possible, associée à une croissance rapide entre 7 et 18 ans.

En cas de fausse protéinurie (extrarénale), la source de protéines dans l'urine est un mélange de leucocytes, d'érythrocytes, de cellules épithéliales des voies urinaires. La décomposition de ces éléments, particulièrement prononcée avec une urine alcaline, conduit à une pénétration de protéines dans l'urine, qui a déjà passé le filtre rénal. Le degré particulièrement élevé de fausse protéinurie donne du sang dans les urines, avec une hématurie profuse, il peut atteindre 30 g / l et plus. Maladies pouvant être accompagnées de protéinurie extrarénale - urolithiase, tuberculose rénale, tumeurs des reins ou des voies urinaires, cystite, pyélite, prostatite, urétrite, vulvovaginite.

La classification clinique comprend la protéinurie légère (moins de 0,5 g / jour), modérée (de 0,5 à 4 g / jour) ou grave (plus de 4 g / jour).

La plupart des patients atteints d'insuffisance rénale, telle que la glomérulonéphrite aiguë ou la pyélonéphrite, présentent une protéinurie modérée, mais les patients atteints du syndrome néphrotique excrètent généralement plus de 4 g de protéines dans l'urine par jour.

Une large gamme de méthodes est utilisée pour le dosage quantitatif des protéines, en particulier la méthode unifiée de Brandberg-Roberts-Stolnikov, la méthode biuret, la méthode à l'acide sulfosalicylique, les méthodes utilisant le colorant bleu de Coomassie, le colorant rouge pyrogallol, etc.

L'utilisation de diverses méthodes pour déterminer la présence de protéines dans l'urine a entraîné une grave confusion dans l'interprétation des limites de la norme de teneur en protéines dans l'urine. Puisque les 2 méthodes les plus couramment utilisées dans les laboratoires - avec l’acide sulfosalicylique et le colorant rouge pyrogallol, nous examinons le problème de l’exactitude des limites des normes les concernant. Du point de vue de la méthode sulfosalicylique dans l'urine normale, la teneur en protéines ne doit pas dépasser 0,03 g / l, et du pyrogallol, 0,1 g / l! Les différences sont triples.

Faibles valeurs de la concentration normale de protéines dans l'urine lors de l'utilisation de sulfosalicylique en raison des points suivants:

  • la courbe d'étalonnage est basée sur une solution aqueuse d'albumine. La composition de l'urine est très différente de celle de l'eau: pH, sel, composés de faible poids moléculaire (créatinine, urée, etc.). En conséquence, selon Altshuler, Rakov et Tkachev, une erreur de détermination de la protéine urinaire peut être 3 fois ou plus! C'est à dire des résultats de détermination corrects ne peuvent être obtenus que dans les cas où l'urine a un poids spécifique très bas et que sa composition et son pH se rapprochent de l'eau;
  • la sensibilité plus élevée de la méthode sulfosalicylique à l'albumine par rapport aux autres protéines (à ce moment-là, comme mentionné ci-dessus, l'albumine dans des échantillons d'urine normale ne représente pas plus de 30% de la protéine totale dans l'urine);
  • si le pH de l'urine est décalé du côté alcalin, l'acide sulfosalicylique est neutralisé, ce qui entraîne également une diminution des résultats du dosage des protéines;
  • la vitesse de sédimentation des précipités est sujette à des variations significatives: à faibles concentrations en protéines, les précipitations sont ralenties et la fin précoce de la réaction conduit à une sous-estimation du résultat;
  • la vitesse de réaction dépend essentiellement du mélange du mélange réactionnel. À forte concentration de protéines, une secousse vigoureuse du tube peut entraîner la formation de gros flocons et leur précipitation rapide.

Toutes les caractéristiques de la méthode énumérées ci-dessus entraînent une sous-estimation significative de la concentration en protéines déterminée dans l'urine. Le degré de sous-déclaration dépend fortement de la composition d'un échantillon d'urine particulier. Étant donné que la méthode de l'acide sulfosalicylique donne une valeur sous-estimée de la concentration en protéines, la limite normale de cette méthode est également de 0,03 g / l, environ trois fois trop basse par rapport aux données fournies dans les ouvrages de référence étrangers sur les diagnostics de laboratoire clinique.

La grande majorité des laboratoires des pays occidentaux ont abandonné l'utilisation de la méthode sulfosalicylique pour déterminer la concentration de protéines dans l'urine et ont activement utilisé la méthode au pyrogallol à cette fin. La méthode au pyrogallol pour déterminer la concentration en protéines dans l’urine et d’autres liquides biologiques est basée sur le principe photométrique de mesure de la densité optique d’un complexe coloré formé par l’interaction de molécules protéiques avec des molécules de colorant rouge pyrogallol et de molybdate de sodium (complexe Pyrogallol rouge - molybdate).

Pourquoi la méthode au pyrogallol permet d’obtenir des résultats plus précis de la mesure de la concentration en protéines dans l’urine? Premièrement, en raison de la plus grande multiplicité de dilutions d'échantillons d'urine dans le mélange réactionnel. Si, dans la méthode sulfosalicylique, le rapport échantillon d'urine / réactif est de 1/3, dans la méthode au pyrogallol, il peut être compris entre 1 / 12,5 et 1/60, selon la variante de la technique, ce qui réduit considérablement l'effet de la composition de l'urine sur le résultat de la mesure. Deuxièmement, la réaction se déroule dans un tampon succinate, c'est-à-dire à un pH stable. Et, enfin, on peut dire que le principe même de la méthode est plus «transparent». Le molybdate de sodium et le colorant rouge pyrogallol forment un complexe avec une molécule de protéine. Cela conduit au fait que les molécules de colorant à l'état libre qui n'absorbent pas la lumière à une longueur d'onde de 600 nm en combinaison avec une protéine absorbent la lumière. Ainsi, nous semblons marquer chaque molécule de protéine d’un colorant et nous constatons que la modification de la densité optique du mélange réactionnel à une longueur d’onde de 600 nm est clairement corrélée à la concentration de protéines dans l’urine. De plus, l’affinité du rouge pyrogallol avec les différentes fractions protéiques étant presque la même, la méthode permet de déterminer la protéine totale dans l’urine. Par conséquent, la limite des valeurs normales de la concentration en protéines dans l'urine est de 0,1 g / l (cela est indiqué dans toutes les directives occidentales modernes en matière de diagnostic clinique et de laboratoire, y compris le «Manuel clinique pour les tests de laboratoire», publié par N. Titsa).. Les caractéristiques comparatives des méthodes pyrogallol et sulfosalicylique pour la détermination de la protéine urinaire sont présentées dans le tableau 1.

En conclusion, je voudrais insister une nouvelle fois sur le fait que, lorsque le laboratoire passe de la méthode sulfosalicylique pour la détermination des protéines urinaires à la méthode pyrogallol, la limite des valeurs normales augmente de manière significative (de 0,03 g / l à 0,1 g / l!). Ce personnel de laboratoire doit certainement informer les cliniciens, car Dans cette situation, le diagnostic de protéinurie ne peut être posé que dans les cas où la teneur en protéines dans l'urine dépasse 0,1 g / l.

Docteur Hépatite

traitement du foie

Protéine normale dans la méthode au pyrogallol dans l'urine

Une personne en bonne santé produit entre 1,0 et 1,5 litre d’urine par jour. Une teneur de 8-10 mg / dl de protéine est un phénomène physiologique. La consommation quotidienne de protéines dans l'urine 100-150 mg ne devrait pas causer de suspicion. La globuline, la mucoprotéine et l'albumine sont les protéines totales dans l'urine. Un débit important d'albumine indique une violation du processus de filtration dans les reins et s'appelle protéinurie ou albuminurie.

Chaque substance présente dans l'urine reçoit un taux "sain", et si l'indice de la protéine fluctue, cela peut indiquer une pathologie des reins.

L'analyse d'urine implique l'utilisation de la première partie (le matin) ou d'un échantillon quotidien. Ce dernier est préférable pour évaluer le niveau de protéinurie, car la teneur en protéines a des fluctuations journalières prononcées. L'urine pendant la journée est recueillie dans un récipient, mesurez le volume total. Pour un laboratoire qui effectue une analyse de protéines dans l'urine, un échantillon standard (de 50 à 100 ml) de ce récipient est suffisant, la quantité restante n'est pas requise. Pour plus d'informations, un test supplémentaire est effectué sur Zimnitsky. Il indique si les indicateurs d'urine par jour sont normaux.

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La protéine dans l'urine est normale chez l'adulte ne doit pas dépasser 0,033 g / l. Dans le même temps, le taux journalier n’est pas supérieur à 0,05 g / l. Pour les femmes enceintes, le taux de protéines dans l'urine quotidienne est plus élevé - 0,3 g / l. Et le matin, l'urine est la même - 0,033 g / l. Les normes de protéines diffèrent dans l'analyse générale de l'urine et chez les enfants: 0,036 g / l pour la portion du matin et 0,06 g / l par jour. Le plus souvent, les laboratoires effectuent une analyse à l'aide de deux méthodes, qui indiquent la quantité de fraction protéique contenue dans l'urine. Les valeurs normales ci-dessus sont valables pour l'analyse effectuée avec l'acide sulfosalicylique. Si un colorant rouge pyrogallol a été utilisé, les valeurs seront trois fois différentes.

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La cause de la protéine dans l'urine peut être un processus pathologique du rein:

  • la filtration dans les glomérules rénaux va dans le mauvais sens;
  • l'absorption dans les tubules protéiques est altérée;
  • Certaines maladies ont une forte charge sur les reins - lorsque les protéines dans le sang sont élevées, les reins n'ont tout simplement pas le temps de les filtrer.

Les autres raisons sont considérées comme non rénales. C'est ainsi que se développe l'albuminurie fonctionnelle. La protéine dans l'analyse de l'urine apparaît dans les réactions allergiques, l'épilepsie, l'insuffisance cardiaque, la leucémie, l'intoxication, le myélome, la chimiothérapie, les maladies systémiques. Le plus souvent, un tel indicateur dans les analyses de patients sera le premier signe d'une maladie hypertensive.

L'augmentation des protéines dans l'urine peut être due à des facteurs de nature non pathologique, des analyses supplémentaires seront donc nécessaires.

Les méthodes quantitatives de détermination des protéines dans l'urine donnent des erreurs, il est donc recommandé d'effectuer plusieurs analyses, puis d'utiliser la formule pour calculer la valeur correcte. La teneur en protéines de l'urine est mesurée en g / l ou en mg / l. Ces indicateurs de protéines permettent de déterminer le niveau de protéinurie, suggérer une cause, estimer le pronostic et déterminer la stratégie.

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Pour le bon fonctionnement du corps, un échange constant entre le sang et les tissus est nécessaire. Cela n'est possible que s'il existe une certaine pression osmotique dans les vaisseaux sanguins. Les protéines plasmatiques sanguines ne font que maintenir un tel niveau de pression, lorsque les substances à faible poids moléculaire passent facilement du milieu à concentration élevée au milieu à concentration plus faible. La perte de molécules de protéines entraîne la libération de sang de son lit dans le tissu, qui présente de nombreux œdèmes. Ceci est la manifestation d'une protéinurie modérée et grave.

Les premiers stades de l’albuminurie sont asymptomatiques. Le patient ne prête attention qu'aux manifestations de la maladie sous-jacente, qui est la cause des protéines dans l'urine.

Une protéinurie à l'état de trace s'appelle une augmentation du niveau de protéines dans l'urine en raison de l'utilisation de certains produits.

L'urine à analyser est collectée dans un récipient propre et écrémé. Avant de ramasser les toilettes est montré périnée, vous devez vous laver avec du savon et de l'eau. Il est conseillé aux femmes de fermer le vagin avec un coton ou un tampon afin que les pertes vaginales n'affectent pas le résultat. À la veille, il est préférable de ne pas boire d'alcool, d'eau minérale, de café, d'épices, de sel et d'aliments qui donnent une couleur à l'urine (myrtilles, betteraves). Un effort physique intense, une longue marche, du stress, de la fièvre et de la transpiration, une consommation excessive d'aliments protéinés ou de médicaments avant de donner de l'urine provoquent l'apparition de protéines dans l'analyse de l'urine d'une personne en parfaite santé. Ce phénomène admissible s'appelle trace de protéinurie.

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Maladie rénale entraînant une perte de protéines:

  • L'amylose Les cellules normales des reins sont remplacées par des amyloïdes (complexe protéine-saccharide), qui empêchent le corps de fonctionner normalement. Au stade protéinurique, des amyloïdes se déposent dans les tissus rénaux, détruisant le néphron et, par conséquent, le filtre rénal. Ainsi, la protéine passe du sang dans l'urine. Cette étape peut durer plus de 10 ans.
  • Néphropathie diabétique. En raison du métabolisme inapproprié des glucides et des lipides, les vaisseaux sanguins, les glomérules et les tubules du rein sont détruits. La présence de protéines dans l'urine est le premier signe d'une complication prévisible du diabète.
  • Maladies de genèse inflammatoire - néphrite. Le plus souvent, les lésions affectent les vaisseaux sanguins, les glomérules et les systèmes pectoraux-pelvis, perturbant ainsi le cours normal du système de filtration.
  • La glomérulonéphrite est dans la plupart des cas de nature auto-immune. Le patient se plaint d'une diminution de la quantité d'urine, de douleurs au bas du dos et d'une augmentation de la pression. Pour le traitement de la glomérulonéphrite, recommander un régime alimentaire, un schéma thérapeutique et un traitement médicamenteux.
  • Pyélonéphrite. Dans la période aiguë survient avec des symptômes d'infection bactérienne: frissons, nausées, maux de tête. C'est une maladie infectieuse.
  • Maladie rénale polykystique.

Dans un corps en bonne santé, les molécules de protéines (et leur taille est plutôt grande) ne peuvent pas passer à travers le système de filtration des reins. Par conséquent, les protéines dans l'urine ne devraient pas l'être. Cet indicateur est le même pour les hommes et les femmes. Si l'analyse indique une protéinurie, il est important de consulter un médecin pour en connaître les raisons. Le spécialiste évaluera le niveau de protéines, la possibilité de rétablir le fonctionnement normal du corps, s'il existe une pathologie concomitante. Selon les statistiques, une femme présente un risque plus élevé de maladie urogénitale qu'un homme.

Principe de la méthode sur la base de la coagulation des protéines dans l’urine en présence d’acide nitrique (ou d’une solution à 20% d’acide sulfosalicylique).

Avancement des travaux: à 5 gouttes d'urine, ajoutez 1-2 gouttes d'acide nitrique (ou sulfosalicylique). En présence de protéines dans l'urine, il apparaît une turbidité.

Tableau Détection de composants pathologiques de l'urine.

Remarque: en présence de glucose et de protéines dans les urines examinées, leur contenu quantitatif est déterminé.

Principe de la méthode: Lorsque la protéine interagit avec le rouge de pyrogallol et le molybdate de sodium, un complexe coloré se forme, dont l’intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration de la protéine dans l’échantillon.

Réactifs: Réactif de travail - solution de pyrogallol rouge dans du tampon succinate, solution de protéine d’étalonnage à une concentration de 0,50 g / l

Les échantillons se mélangent, attendez 10 minutes. à température ambiante (18-25 ° C). Mesurer la densité optique de l'échantillon expérimental (Dop) et d'étalonnage (Dk) par rapport à l'échantillon témoin à λ = 598 (578-610) nm. La coloration est stable pendant 1 heure.

Calcul: la concentration en protéines dans l'urine (C) g / l est calculée par la formule:

où: Dop = Dk = C = g / l.

Valeurs normales: jusqu'à 0,094 g / l, (0,141 g / jour)

Principe de la méthode: Lorsque le D-glucose est oxydé par l'oxygène atmosphérique sous l'action de la glucose oxydase, il se forme une quantité équimolaire de peroxyde d'hydrogène. Sous l'action de la peroxydase, le peroxyde d'hydrogène oxyde les substrats chromogènes (mélange de phénol et de 4 aminoantipirine - 4ААP) en formant un produit coloré. L'intensité de la couleur est proportionnelle à la teneur en glucose.

Glucose + O2 + H2O gluconolactone + H2O2

2H2O2 + phénol + 4AAP composé coloré + 4H2O

Avancement des travaux: 1 ml de la solution de travail et 0,5 ml de tampon phosphate sont introduits dans deux tubes. 0,02 ml d'urine est ajouté au premier tube et 0,02 ml de l'étalon au second (étalonnage, solution de glucose standard, 10 mmol / l). Les échantillons sont mélangés, incubés pendant 15 minutes à une température de 37 ° C dans un thermostat et la densité optique des échantillons expérimentaux (Dop) et d'étalonnage (Dk) par rapport au réactif de travail est mesurée à une longueur d'onde de 500-546 nm.

Calcul: C = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

La teneur en glucose dans l'urine quotidienne est déterminée en mmol / jour en multipliant le résultat obtenu par le volume d'urine collecté par jour.

Note Lorsque le taux de sucre dans l’urine est supérieur à 1%, il faut le diluer.

Actuellement, les laboratoires biochimiques utilisent une méthode unifiée pour analyser le taux de glucose dans les urines en utilisant un test réactif du glucose ou des bandelettes combinées pour le PH, les protéines, le glucose, les corps cétoniques et le sang. Bandelettes réactives immergées dans un récipient contenant de l'urine pendant 1 seconde. et comparez la couleur sur l'échelle.

Détermination de la protéine en utilisant l'indicateur rouge pyrogallol

Le principe de la méthode repose sur la mesure photométrique de la densité optique d'une solution d'un complexe coloré formé par l'interaction de molécules de protéines avec des molécules du complexe de colorant rouge pyrogallol et de molybdate de sodium (complexe Pyrogallol rouge-molybdate) en milieu acide. L'intensité de la couleur de la solution est proportionnelle à la teneur en protéines du matériau à l'étude. La présence de détergents dans le réactif fournit une définition équivalente de protéines de nature et de structure différentes.

Réactifs. 1) Solution de rouge de pyrogallol (PGK) à 1,5 mmol / l: 60 mg de PGK dissous dans 100 ml de méthanol. Conserver à une température de 0 à 5 ° C; 2) solution tampon succinate à 50 mmol / l, pH 2,5: 5,9 g d'acide succinique (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g d'oxalate de sodium (Na2C204) et 0,5 g de benzoate de sodium (C6H5COONa) sont dissous dans 900 ml d'eau distillée; 3) Solution à 10 mmol / l de cristal de molybdate de sodium hydraté (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg de molybdate de sodium sont dissous dans 100 ml d'eau distillée; 4) Réactif de travail: à 900 ml de solution tampon de succinate, ajouter 40 ml de solution de PHC et 4 ml de solution de molybdate de sodium. Le pH de la solution est ajusté à 2,5 avec une solution d'acide chlorhydrique à 0,1 mol / l et son volume est ajusté à 1 l. Le réactif sous cette forme est prêt à l'emploi et est stable lorsqu'il est conservé dans un endroit sombre et à une température de 2 à 25 ° C pendant 6 mois; 5) solution d'albumine standard à 0,5 g / l.

Le cours de la détermination. On introduit 0,05 ml de l'urine étudiée dans le premier tube à essai, 0,05 ml de solution standard d'albumine dans le deuxième tube à essai et 0,05 ml d'eau distillée dans le troisième tube à essai (échantillon de contrôle), puis 3 ml de réactif de travail. Le contenu des tubes est mélangé et après 10 minutes, l'échantillon et l'étalon sont soumis à une photométrie par rapport à un échantillon témoin à une longueur d'onde de 596 nm dans une cuvette avec un trajet optique de 10 mm.

Le calcul de la concentration en protéines dans l'échantillon d'urine analysé est effectué selon la formule suivante:

C = 0,5 × Apr / Ast,

où C est la concentration en protéines dans l'échantillon d'urine analysé, en g / l; Apr et Ast - extinction de l'échantillon d'urine étudié et de la solution standard d'albumine, en g / l; 0,5 - concentration de solution d'albumine étalon, g / l.

  • la couleur de la solution (complexe de couleur) est stable pendant une heure;
  • la relation directement proportionnelle entre la concentration de protéines dans l'échantillon et l'absorption de la solution dépend du type de photomètre;
  • lorsque la teneur en protéines dans l'urine est supérieure à 3 g / l, l'échantillon est dilué avec une solution de chlorure de sodium isotonique (9 g / l) et la détermination est répétée. Le degré de dilution est pris en compte lors de la détermination de la concentration en protéines.
  • Détermination des protéines dans l'urine
  • Essai unifié sur l'acide sulfosalicylique
  • Le Brandberg Unifié - Méthode Roberts - Stolnikov
  • Détermination de la quantité de protéines dans l'urine par réaction avec de l'acide sulfosalicylique
  • Méthode Biuret
  • Détection dans l'urine de la protéine Bens-Jones

La protéinurie - un phénomène dans lequel une protéine est détectée dans l'urine, ce qui indique la possibilité de lésions rénales, est un facteur dans le développement d'une maladie cardiaque, de vaisseaux sanguins, de vaisseaux lymphatiques.

La détection de protéines dans l'urine n'indique pas toujours une maladie. Un phénomène similaire est typique même chez les personnes en parfaite santé, dans lesquelles on détecte des protéines urinaires. L'hypothermie, l'effort physique, la consommation d'aliments protéinés conduisent à l'apparition de protéines dans l'urine, qui disparaissent sans traitement.

Au cours du dépistage, 17% des personnes pratiquement en bonne santé déterminent les protéines, mais seulement 2% de ces personnes présentent un résultat de test positif comme signe d'insuffisance rénale.

Les molécules de protéines ne doivent pas pénétrer dans le sang. Ils sont essentiels pour le corps - ils sont un matériau de construction pour les cellules, participent aux réactions telles que les coenzymes, les hormones, les anticorps. Chez les hommes comme chez les femmes, le taux est l'absence totale de protéines dans l'urine.

La fonction de prévention de la perte de molécules de protéines par l'organisme est assurée par les reins.

Deux systèmes de reins sont impliqués dans la filtration de l'urine:

  1. glomérules - ne laissez pas entrer de grosses molécules, mais ne retenez pas l'albumine, les globulines - une petite fraction des molécules de protéines;
  2. tubules rénaux - adsorbent les glomérules filtrées par les protéines, reviennent dans le système circulatoire.

L'albumine (environ 49%), les mucoprotéines, les globulines sont présentes dans l'urine, la proportion d'immunoglobulines représentant environ 20%.

Globulines - protéines de lactosérum de poids moléculaire élevé, produites par le système immunitaire et le foie. La plupart d'entre eux sont synthétisés par le système immunitaire, se réfère à des immunoglobulines ou des anticorps.

Les albumines sont la fraction de protéines qui apparaît pour la première fois dans l'urine, même avec des lésions rénales mineures. Il y a un peu d'albumine dans des urines saines, mais c'est tellement insignifiant qu'il ne peut pas être détecté par un diagnostic de laboratoire.

Le seuil inférieur détectable à l'aide des diagnostics de laboratoire est de 0,033 g / l. Si plus de 150 mg de protéines sont perdus par jour, ils parlent de protéinurie.

Données de base sur les protéines pour l'urine

La maladie avec protéinurie légère est asymptomatique. Visuellement, l'urine sans protéines ne peut pas être distinguée de l'urine, dans laquelle il y a une petite quantité de protéines. Quelques urines mousseuses présentent déjà un degré élevé de protéinurie.

Il est possible de supposer une excrétion active de protéines dans l'urine dès l'apparition du patient que si le degré de maladie est modéré ou grave en raison de l'apparition d'un œdème des membres, du visage et de l'abdomen.

Aux premiers stades de la maladie, peuvent apparaître des signes indirects de protéinurie:

  • décoloration de l'urine;
  • faiblesse croissante;
  • manque d'appétit;
  • nausée, vomissement;
  • douleur osseuse;
  • somnolence, vertiges;
  • température élevée.

L'apparition de tels signes ne peut être ignorée, en particulier pendant la grossesse. Cela peut signifier un léger écart par rapport à la norme et peut être un symptôme du développement de la prééclampsie, de la prééclampsie.

L'évaluation quantitative de la perte en protéines n'est pas une tâche facile. Afin de brosser un tableau plus complet de l'état du patient, plusieurs tests de laboratoire sont utilisés.

Les difficultés à choisir une méthode pour détecter l'excès de protéines dans l'urine s'expliquent par:

  • faible concentration en protéines, ce qui nécessite des instruments de haute précision pour la reconnaissance;
  • composition de l'urine, ce qui complique la tâche, car il contient des substances qui faussent le résultat.

La plus grande information est fournie par l'analyse de la première urine du matin, qui est recueillie après le réveil.

A la veille de l'analyse, les conditions suivantes doivent être remplies:

  • Ne pas manger épicé, frit, aliments protéinés, alcool;
  • exclure les diurétiques pendant 48 heures;
  • limiter l'activité physique;
  • suivre attentivement les règles d'hygiène personnelle.

L'urine du matin est la plus informative, car elle est à long terme dans la vessie et moins dépendante de la prise de nourriture.

Il est possible d'analyser la quantité de protéines dans l'urine par une portion aléatoire, qui est prise à tout moment, mais cette analyse est moins informative, plus la probabilité d'erreur est grande.

Pour quantifier la perte de protéines quotidienne, une analyse totale des urines par jour est effectuée. Pour ce faire, dans les 24 heures, collectez dans un récipient en plastique spécial toute l’urine affectée à la journée. Vous pouvez commencer à collecter à tout moment. La condition principale - exactement le jour de la collecte.

La définition qualitative de la protéinurie repose sur la dénaturation de la protéine par des facteurs physiques ou chimiques. Les méthodes qualitatives concernent le dépistage, ce qui permet d’établir la présence de protéines dans l’urine, mais ne permet pas d’évaluer avec précision le degré de protéinurie.

Échantillons utilisés:

  • à ébullition;
  • acide sulfosalicylique;
  • acide nitrique, réactif Larionic dans l’échantillon d’anneau de Heller.

Un échantillon avec de l'acide sulfosalicylique est réalisé en comparant un échantillon d'urine témoin avec un échantillon expérimenté, dans lequel 7 à 8 gouttes d'acide sulfosalicylique à 20% sont ajoutées à l'urine. La conclusion à propos de la présence de la protéine est établie en fonction de l'intensité de la nébulosité opalescente qui apparaît dans le tube à essai au cours de la réaction.

Test de Geller plus couramment utilisé avec de l'acide nitrique à 50%. La sensibilité de la méthode est de 0,033 g / l. À cette concentration de protéines dans un tube à essai contenant un échantillon d'urine et un réactif pendant 2-3 minutes après le début de l'expérience, un anneau de fil blanc apparaît, dont la formation indique la présence de protéines.

Les méthodes semi-quantitatives comprennent:

  • méthode de détermination des protéines dans des bandelettes de test d'urine;
  • Méthode de Brandberg-Roberts-Stolnikov.

La méthode de détermination selon la méthode de Brandberg-Roberts-Stolnikov est basée sur la méthode de l'anneau de Geller, mais permet d'estimer plus précisément la quantité de protéine. Lors de l'exécution d'un test utilisant cette technique avec plusieurs dilutions d'urine, un anneau protéique filamenteux apparaît dans l'intervalle de temps compris entre 2 et 3 minutes à compter du début du test.

En pratique, la méthode de la bandelette réactive avec le colorant bleu bromophénol appliqué est utilisée comme indicateur. L'absence de bandelettes réactives est une sensibilité sélective à l'albumine, ce qui entraîne une distorsion des résultats en cas d'augmentation de la concentration en urines de globulines ou d'autres protéines.

Les inconvénients de la méthode incluent également la sensibilité relativement faible du test à la protéine. Les bandelettes réactives commencent à réagir à la présence de protéines dans l'urine à une concentration en protéines supérieure à 0,15 g / l.

Les méthodes d'évaluation quantitative peuvent être divisées de manière conditionnelle en:

Les méthodes sont basées sur la propriété des protéines de réduire la solubilité sous l'action d'un agent de liaison avec la formation d'un composé faiblement soluble.

Les agents responsables de la liaison aux protéines peuvent être:

  • acide sulfosalicylique;
  • acide trichloroacétique;
  • chlorure de benzéthonium.

Les résultats du test permettent de tirer des conclusions sur le degré d'atténuation du flux lumineux dans l'échantillon avec suspension par rapport à celui témoin. Les résultats de cette méthode ne peuvent pas toujours être considérés comme fiables en raison des différences dans les conditions suivantes: vitesse de mélange des réactifs, température, acidité du milieu.

L'effet sur l'évaluation de la prise de médicaments la veille de la veille des tests utilisant ces méthodes ne peut pas être pris:

  • des antibiotiques;
  • les sulfonamides;
  • médicaments contenant de l'iode.

La méthode se réfère à disponible au coût, ce qui lui permet d'être largement utilisé pour le dépistage. Mais des résultats plus précis peuvent être obtenus en utilisant des techniques colorimétriques plus coûteuses.

Les méthodes sensibles qui déterminent avec précision la concentration de protéines dans l'urine incluent les méthodes colorimétriques.

Vous pouvez le faire avec une grande précision:

  • réaction de biuret;
  • technique Lowry;
  • Les techniques de coloration qui utilisent des colorants qui forment des complexes avec des protéines urinaires qui diffèrent visuellement d’un échantillon.

Méthodes colorimétriques pour détecter les protéines dans l'urine

La méthode se réfère à une méthode fiable, très sensible, permettant de déterminer dans l'urine l'albumine, les globulines, les paraprotéines. Il est utilisé comme principale méthode de clarification des résultats de tests controversés, ainsi que des protéines urinaires quotidiennes chez les patients présentant des services de néphrologie dans des hôpitaux.

Des résultats encore plus précis peuvent être obtenus avec la méthode de Lowry, basée sur la réaction du biuret, ainsi qu'avec la réaction de Folin, qui reconnaît le tryptophane et la tyrosine dans les molécules de protéines.

Pour éliminer les erreurs éventuelles, l’échantillon d’urine est purifié par dialyse à partir d’acides aminés, l’acide urique. Des erreurs sont possibles avec l’utilisation de salicylates, de tétracyclines, de chlorpromazine.

La méthode la plus précise pour déterminer une protéine repose sur sa propriété de se lier aux colorants utilisés:

  • ponso;
  • Coomassie bleu brillant;
  • rouge pyrogallique.

Au cours de la journée, la quantité de protéines excrétée dans les urines varie. Pour évaluer de manière plus objective la perte de protéines dans l'urine, introduisez le concept de protéine quotidienne dans l'urine. Cette valeur est mesurée en g / jour.

Pour une évaluation rapide des protéines quotidiennes dans l'urine, la quantité de protéines et de créatinine est déterminée dans une seule portion d'urine, puis le rapport protéine / créatinine est calculé sur la base de la perte de protéines par jour.

La méthode est basée sur le fait que le taux d'excrétion de créatinine urinaire est constant, il ne change pas pendant la journée. Chez une personne en bonne santé, le rapport normal protéine / créatinine dans les urines est de 0,2.

Cette méthode élimine les erreurs pouvant survenir lors de la collecte quotidienne de l'urine.

Les tests qualitatifs plus souvent que les tests quantitatifs donnent des résultats faussement positifs ou faussement négatifs. Des erreurs sont liées aux médicaments, aux habitudes alimentaires et à l'activité physique à la veille de l'analyse.

Le décodage de ce test qualitatif est donné par une évaluation visuelle de la turbidité dans l’éprouvette en comparaison avec le résultat du test avec le contrôle:

  1. la réaction positive faible est estimée à +;
  2. positif ++;
  3. nettement positif +++.

Le test de l'anneau de Geller évalue plus précisément la présence de protéines dans l'urine, mais ne permet pas de quantifier les protéines dans l'urine. Comme le test de l'acide sulfosalicylique, le test de Geller ne donne qu'une idée approximative de la teneur en protéines de l'urine.

La méthode permet d’évaluer quantitativement le degré de protéinurie, mais elle prend trop de temps et est imprécise car, avec une forte dilution, la précision de l’évaluation diminue.

Pour calculer la protéine, vous devez multiplier le degré de dilution de l'urine par 0, 033 g / l:

Le test ne nécessite pas de conditions spéciales, cette procédure est facile à faire à la maison. Pour ce faire, vous devez abaisser la bandelette dans l'urine pendant 2 minutes.

Les résultats seront exprimés par le nombre de points positifs sur la bande dont le décodage est contenu dans le tableau:

  1. Les résultats des tests correspondant à des valeurs allant jusqu'à 30 mg / 100 ml correspondent à une protéinurie physiologique.
  2. Les valeurs sur les bandelettes réactives 1+ et 2 ++ indiquent une protéinurie significative.
  3. Les valeurs de 3 +++, 4 ++++ sont marquées par une protéinurie pathologique causée par une maladie rénale.

Les bandelettes réactives ne peuvent que déterminer approximativement l’augmentation des protéines dans l’urine. Pour un diagnostic précis, ils ne sont pas utilisés, et plus encore, ils ne peuvent pas dire ce que cela signifie.

Ne laissez pas les bandelettes réactives évaluer correctement la quantité de protéines dans l’urine des femmes enceintes. Une méthode d'évaluation plus fiable consiste à déterminer la présence de protéines dans l'urine quotidienne.

Détermination des protéines urinaires à l'aide de bandelettes réactives:

La présence quotidienne de protéines dans l'urine constitue un diagnostic plus précis de l'évaluation de l'état fonctionnel des reins. Pour cela, vous devez collecter chaque jour l'urine excrétée par les reins.

La teneur en protéines dans l'urine peut être trouvée par le rapport protéine: créatinine, les données sont présentées dans le tableau suivant:

Les valeurs valides pour le rapport protéine / créatinine sont les données du tableau:

Avec la perte de plus de 3,5 g de protéines par jour, on parle alors de protéinurie massive.

S'il y a beaucoup de protéines dans l'urine, un nouvel examen est requis après 1 mois, puis après 3 mois, en fonction des résultats, qui établissent le dépassement de la norme.

Les causes de l'augmentation de la quantité de protéines dans l'urine sont l'augmentation de sa production dans le corps et l'altération de la fonction rénale. On distingue la protéinurie:

  • physiologiques - les déviations mineures par rapport à la norme sont causées par des processus physiologiques, résolus spontanément;
  • pathologique - les changements sont causés à la suite du processus pathologique dans les reins ou d'autres organes du corps, sans que le traitement progresse.

Une légère augmentation des protéines peut être observée avec une alimentation protéique abondante, des brûlures mécaniques, des blessures, accompagnée d'une production accrue d'immunoglobulines.

Une protéinurie légère peut être causée par un effort physique, un stress psycho-émotionnel ou la prise de certains médicaments.

La protéinurie physiologique est une augmentation des protéines urinaires chez les enfants dans les premiers jours après la naissance. Mais après une semaine de vie, la teneur en protéines dans l'urine d'un enfant est considérée comme un écart par rapport à la norme et indique une pathologie en développement.

Les maladies rénales, les maladies infectieuses sont aussi parfois accompagnées de l’apparition de protéines dans les urines.

De tels états correspondent généralement à un degré modéré de protéinurie, sont des phénomènes transitoires, se transmettent rapidement d'eux-mêmes, sans nécessiter de traitement particulier.

Des conditions plus graves, une protéinurie grave est notée dans les cas de:

  • glomérulonéphrite;
  • le diabète;
  • maladie cardiaque;
  • cancer de la vessie;
  • myélome multiple;
  • infection, dégâts des médicaments, maladie polykystique des reins;
  • hypertension artérielle;
  • lupus érythémateux disséminé;
  • Syndrome de Goodpasture.

L’obstruction intestinale, l’insuffisance cardiaque et l’hyperthyroïdie peuvent provoquer des traces de protéines dans l’urine.

Les variétés de protéinurie sont classées de plusieurs manières. Pour une évaluation qualitative des protéines, on peut utiliser la classification de Yaroshevsky.

Selon la systématique, Yaroshevsky, créé en 1971, distingue la protéinurie:

  1. rénal - ce qui inclut une violation de la filtration glomérulaire, la libération de la protéine des tubules, l'absence de réadsorption des protéines dans les tubules;
  2. prérénal - se produit en dehors des reins, excrétion de l'hémoglobine, protéines présentes en excès dans le sang à la suite d'un myélome multiple;
  3. Postrenal - se produit sur le site des voies urinaires, après les reins, l’excrétion de protéines lors de la destruction des organes urinaires.

Pour une évaluation quantitative de ce qui se passe, les degrés de protéinurie conditionnelle sont isolés. Il faut se rappeler qu’ils peuvent facilement passer à un traitement plus lourd sans traitement.

Le stade le plus grave de la protéinurie se développe avec la perte de plus de 3 g de protéines par jour. La perte de protéines de 30 mg à 300 mg par jour correspond au stade modéré ou à la microalbumurie. Jusqu'à 30 mg de protéines dans l'urine quotidienne signifient une protéinurie légère.

Norme de protéine dans l'urine combien?

    Les protéines normales dans les urines sont pratiquement absentes (moins de 0,002 g / l). Cependant, dans certaines conditions, une petite quantité de protéines peut apparaître dans l'urine chez des individus en bonne santé après l'ingestion d'une grande quantité d'aliments protéiques, en raison du refroidissement, du stress émotionnel, d'un effort physique prolongé (la protéinurie de marche).

L'apparition d'une quantité importante de protéines dans l'urine (protéinurie) est une pathologie. La protéinurie peut être causée par une maladie rénale (glomérulonéphrite aiguë et chronique, pyélonéphrite, néphropathie enceinte, etc.) ou des voies urinaires (inflammation de la vessie, de la prostate, des uretères). La protéinurie rénale peut être organique (glomérulaire, tubulaire et en excès) et fonctionnelle (protéinurie fébrile, orthostatique chez l'adolescent, en cas de suralimentation du nouveau-né). La protéinurie fonctionnelle n'est pas associée à une pathologie rénale. La quantité quotidienne de protéines varie chez les patients entre 0,1 et 3,0 g ou plus. La composition des protéines urinaires est déterminée par électrophorèse. L'apparition dans l'urine de la protéine Bens-Jones est caractéristique du myélome et de la macroglobulinémie de Waldenström, n ° 223; 2 microglobulines en cas de lésion des tubules rénaux.

  • Les protéines normales dans les urines sont pratiquement absentes (moins de 0,002 g / l).
  • Les principaux signes de maladie détectés dans l'étude de l'urine.

    SG Poids spécifique. Une diminution du poids spécifique indique une diminution de la capacité des reins à concentrer l'urine et à éliminer les toxines du corps, ce qui se produit en cas d'insuffisance rénale. L'augmentation du poids spécifique est associée à une grande quantité de sucre dans l'urine, des sels. Il est à noter qu'il est impossible d'évaluer la gravité spécifique pour un seul test d'urine. Il peut y avoir des modifications aléatoires. Il est nécessaire de répéter l'analyse de l'urine une à deux fois.

    Protéine Protéine dans l'urine - protéinurie. La protéinurie peut être causée par des lésions aux reins dans le cas de la néphrite, de l'amylose, et par des dommages causés par des poisons. Des protéines dans l'urine peuvent également apparaître en raison de maladies des voies urinaires (pyélonéphrite, cystite, prostatite).

    Glucose Glucose (sucre) dans les urines - glycosurie - le plus souvent dû au diabète. Une cause plus rare est la défaite des tubules rénaux. Il est très inquiétant que des corps cétoniques soient détectés avec du sucre dans l’urine. Cela se produit avec le diabète sucré grave mal aligné et est un signe avant-coureur des complications les plus graves du diabète - le coma diabétique.

    La bilirubine, l'urobilinogène La bilirubine et l'urobiline sont déterminées dans l'urine sous différentes formes d'ictère.

    Erythrocytes Erythrocytes dans l'urine - hématurie. Cela se produit soit avec la défaite des reins eux-mêmes, le plus souvent avec leur inflammation, soit chez les patients atteints de maladies des voies urinaires. Si, par exemple, une pierre se déplace le long de celle-ci, elle peut blesser la membrane muqueuse, il y aura des globules rouges dans l'urine. Une tumeur rénale en décomposition peut également entraîner une hématurie.

    Leucocytes Leucocytes dans les urines - leucocyturie, le plus souvent le résultat de modifications inflammatoires du tractus urinaire chez les patients atteints de pyélonéphrite, de cystite. Les leucocytes sont souvent déterminés par une inflammation des organes génitaux externes de la femme, chez l'homme, par une inflammation de la prostate.

    Cylindres Les cylindres sont des structures microscopiques particulières. Les bouteilles hyalines en quantité de 1-2 peuvent être chez une personne en bonne santé. Elles se forment dans les tubules rénaux, ce sont des particules de protéines collées ensemble. Mais une augmentation de leur nombre, cylindres d'autres types (granulaire, érythrocyte, gras) indique toujours les dommages du tissu rénal lui-même. Il existe des cylindres dans les maladies inflammatoires des reins, les lésions métaboliques, telles que le diabète.

    Méthode informative et ses limites. Le contenu en informations de l'analyse d'urine en général pour la détection de maladies spécifiques des reins est faible et nécessite généralement des études supplémentaires plus précises. Mais la recherche est très importante, en particulier lors d’études préventives, car elle permet d’identifier les premiers signes de maladie rénale. On sait également que les maladies du rein sont souvent cachées et que seule une étude de l'urine leur permet de suspecter et de procéder à un examen supplémentaire nécessaire.

    Dans la plupart des laboratoires, lors de l'analyse de protéines dans l'urine, commencez par utiliser des réactions qualitatives ne détectant pas les protéines dans l'urine d'une personne en bonne santé. Si les protéines dans l'urine sont détectées par des réactions qualitatives, une détermination quantitative (ou semi-quantitative) est effectuée. Dans le même temps, les caractéristiques des méthodes utilisées couvrant un spectre différent d'uroprotéines sont importantes. Ainsi, lors de la détermination de la protéine à l'aide d'acide sulfosalicylique à 3%, la quantité de protéine est considérée comme normale jusqu'à 0,03 g / l, tandis que la méthode au pyrogallol est utilisée, la limite des valeurs normales de protéines s'élevant à 0,1 g / l. À cet égard, dans le formulaire d'analyse, il est nécessaire d'indiquer la valeur normale de la protéine pour la méthode utilisée par le laboratoire.

    Lors de la détermination des quantités minimales de protéines, il est recommandé de répéter l’analyse; en cas de doute, la perte journalière de protéines dans l’urine doit être déterminée. L'urine quotidienne normale contient des protéines en petites quantités. Dans des conditions physiologiques, la protéine filtrée est presque complètement réabsorbée par l'épithélium des tubules proximaux et son contenu dans la quantité quotidienne d'urine varie selon les auteurs, des traces à 20 50, 80 100 mg et même 150 à 200 mg. Certains auteurs pensent que l'excrétion quotidienne de protéines à raison de 30 à 50 mg / jour est la norme physiologique pour un adulte. D'autres pensent que l'excrétion urinaire de protéines ne devrait pas dépasser 60 mg / m2 de surface corporelle par jour, à l'exclusion du premier mois de vie, lorsque la valeur de la protéinurie physiologique peut être quatre fois supérieure aux valeurs spécifiées.

    L’état général de l’apparition de protéines dans l’urine d’une personne en bonne santé est leur concentration assez élevée dans le sang et leur poids moléculaire ne dépassant pas 100 200 kDa.

  • ce n'est pas la norme, avec votre diagnostic, il est possible, une autre chose est que pour le syndrome néphrotique, il s'agit en fait d'un petit indicateur.. regardez la clinique - œdème, pression, etc., continuez à suivre le traitement prescrit..
  • et pourtant je dirai: c’est bien de ne pas être!
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